Fenilgalactozidă CAS:2818-58-8

Efectul asupra activității enzimelor: Fenilgalactozida este utilizată în mod obișnuit pentru a măsura activitatea enzimei β-galactozidazei.Când fenilgalactozida este hidrolizată de β-galactozidază, eliberează p-nitrofenol.Acumularea de p-nitrofenol poate fi măsurată cantitativ, oferind perspective asupra activității β-galactozidazei.Acest efect este valorificat în aplicații precum testele enzimatice și sistemele de screening.

Analiza expresiei genelor: Fenilgalactozida este adesea folosită ca substrat în experimentele de biologie moleculară pentru a studia expresia genelor.Gena lacZ, care codifică β-galactozidaza, este de obicei fuzionată cu secvențe reglatoare ale altor gene de interes.Expresia genei lacZ și hidroliza fenilgalactozidei de către p-galactozidază pot indica modelul de expresie și nivelul genei țintă care este studiată.

Sisteme de screening: Fenilgalactozida este o componentă importantă a sistemelor de screening care utilizează activitatea β-galactozidazei.Un exemplu cunoscut este metoda de screening albastru-alb, care este utilizată pentru a identifica celulele recombinate sau transformate în experimentele de biologie moleculară.Coloniile care au preluat cu succes ADN-ul recombinat sau au suferit recombinare genetică vor exprima β-galactozidaza, ducând la hidroliza fenilgalactozidei și la formarea unei culori albastre.

Purificarea proteinelor: în unele cazuri, fenilgalactozida poate fi utilizată ca ligand pentru cromatografia de afinitate pentru a purifica proteinele care se leagă în mod specific la sau sunt activate de p-galactozidază.Proteina de interes poate avea o etichetă de afinitate sau o etichetă de fuziune care conţine un domeniu de legare la p-galactozidază.Prin trecerea amestecului de proteine ​​printr-o coloană cu fenilgalactozidă imobilizată, proteina dorită poate fi reţinută selectiv şi ulterior eluată.